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羊ELISA試劑盒作用的基本原理和使用技巧分別是怎樣的

更新時(shí)間:2022-04-20點(diǎn)擊次數(shù):1415
   羊ELISA試劑盒作用的基本原理:抗原或抗體能吸附到固相載體表面,并保持其免疫學(xué)活性;抗原或抗體可通過(guò)共價(jià)鍵與酶連接形成酶結(jié)合物,仍保持其免疫學(xué)和酶學(xué)活性;酶結(jié)合物與相應(yīng)抗原或抗體結(jié)合后,可根據(jù)加入底物的顏色反應(yīng)來(lái)判定是否有免疫反應(yīng)的存在,而且顏色反應(yīng)的深淺是與標(biāo)本中相應(yīng)抗原或抗體的量成正比例,因此,可以按底物顯色的程度顯示試驗(yàn)結(jié)果。
  羊ELISA試劑盒使用的一些技巧:
  1.血清:室溫血液天然凝結(jié)10-20分鐘,離心20分鐘左右。細(xì)心搜集上清,保存過(guò)程中如呈現(xiàn)沉積,應(yīng)再次離心。
  2.血漿:應(yīng)根據(jù)羊ELISA試劑盒的標(biāo)本的要求挑選EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右,保存過(guò)程中如有沉積構(gòu)成,應(yīng)該再次離心。
  3.尿液:用無(wú)菌管搜集,離心20分鐘左右。細(xì)心搜集上清,保存過(guò)程中如有沉積構(gòu)成,應(yīng)再次離心。
  4.細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管搜集。離心20分鐘左右。細(xì)心搜集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度到達(dá)100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融,以使細(xì)胞損壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右。細(xì)心搜集上清。保存過(guò)程中如有沉積構(gòu)成,應(yīng)再次離心。
  5.安排標(biāo)本:切開標(biāo)本后,稱取分量。參加一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本消融后依然堅(jiān)持2-8℃的溫度。參加一定量的PBS,用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充沛。離心20分鐘左右。細(xì)心搜集上清。分裝后一份待檢測(cè),其他冷凍備用。
  6.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行試驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)防止反復(fù)凍融.
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