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免疫球蛋白試劑盒使用技巧和要求

 更新時(shí)間:2022-01-05 點(diǎn)擊量:1149
   免疫球蛋白試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)。 往預(yù)先包被(IgY)elisa檢測,促長激素釋放激素捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的(IgY)elisa檢測,促長激素釋放激素呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計(jì)算樣品濃度。

  免疫球蛋白試劑盒使用技巧和要求:
  1.試劑的選擇:選擇優(yōu)良試劑大家都是知道的,但是在檢測之前還應(yīng)該提前半個(gè)小時(shí)將試劑拿到常溫下進(jìn)行解凍。
  2.加樣中可能遇到的問題:在做血清或是血漿用于檢測試劑的時(shí)候,會碰到血清血漿不好分離的情況,這個(gè)時(shí)候的解決辦法是先放在常溫中1到2小時(shí),然后在進(jìn)行離心處理。
  3.洗板時(shí)容易造成誤差: 因?yàn)橄窗迨侨斯は吹模耘袛嗍裁磿r(shí)候洗干凈了也是人為判斷的,這個(gè)時(shí)候帶有主觀色彩,所以多清洗幾次,還有就是在洗的時(shí)候孔與孔之間的液體容易交叉流動(dòng)。
  4.顯色問題: 使用了過期的顯色劑或者是顯色劑用過后放置時(shí)間太長,都有可能造成顯色劑不顯色。所以在進(jìn)行顯色反應(yīng)的時(shí)候,要先查看顯色劑本身的情況。
  5.終止反應(yīng):在加終止劑的時(shí)候由于傾倒速度快,差生氣泡,造成假陽性結(jié)果。所以在倒終止劑的時(shí)候要緩慢倒。
  6.讀板:讀板的時(shí)候首先應(yīng)該保證板的清潔干凈。


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