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ELISA試劑盒標(biāo)本的稀釋標(biāo)準(zhǔn)

更新時(shí)間:2020-01-17點(diǎn)擊次數(shù):1612
   在做ELISA實(shí)驗(yàn)的時(shí)候,所采集的標(biāo)本大多都需要稀釋后才能用來做實(shí)驗(yàn)。有的ELISA試劑盒里說明書上有寫標(biāo)本的稀釋比例,這樣您就可以直接通過比例進(jìn)行稀釋,由于沒有經(jīng)驗(yàn)可尋,造成新用戶出現(xiàn)無從下手的感覺,今天廠家就帶你去細(xì)細(xì)的了解下。
  ELISA試劑盒標(biāo)本的稀釋標(biāo)準(zhǔn):
  首先通過文獻(xiàn)檢索的方式了解待測樣本的大致含量,確定適當(dāng)?shù)南♂尡稊?shù)。只有稀釋至標(biāo)準(zhǔn)曲線的范圍內(nèi),檢測的結(jié)果才是準(zhǔn)確的。稀釋的過程中,應(yīng)做好詳細(xì)的記錄。zui后計(jì)算濃度時(shí),稀釋了“N”倍,標(biāo)本的濃度應(yīng)再乘以“N”。
  標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋原則:2瓶,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為300pg/ml,做系列倍比稀釋后,分別稀釋300pg/ml,150pg/ml,75pg/ml,37.5pg/ml,18.5pg/ml,9pg/ml,4.5pg/ml,樣品稀釋液直接作為標(biāo)準(zhǔn)濃度0pg/ml,臨用前15分鐘內(nèi)配制。
  如配制150pg/ml標(biāo)準(zhǔn)品:取0.5ml(不要少于0.5ml)300pg/ml的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
  生物素標(biāo)記抗體的稀釋原則:
  臨用前以生物素標(biāo)記抗體稀釋液稀釋,稀釋前根據(jù)預(yù)先計(jì)算好的每次實(shí)驗(yàn)所需的總量配制(每孔100μl),實(shí)際配制時(shí)應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10μl生物素標(biāo)記抗體加990μl生物素標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時(shí)內(nèi)配制。
  辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素的稀釋原則:
  臨用前以辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液稀釋,稀釋前根據(jù)預(yù)先計(jì)算好的每次實(shí)驗(yàn)所需的總量配制(每孔100μl),實(shí)際配制時(shí)應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10μl辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素加990μl辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時(shí)內(nèi)配制。
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